أخبار عاجلة

صبغة غرام طريقة صبغ البكتيريا بها

طريقة صبغ البكتيريا بها

الطريقة تتألّف من ثلاث خطوات هي

  • التلوين- إزالة التلوين- ثمّ التلوين المعاكس
  • 1- في المرحلة الأولى يتمّ التلوين ب بنفسجيّ غنتيان (أو المعروف بـ Crystal violet) المضاف إلى فينول الفينول Phenol (المعروف تاريخيّا بالكاربول Carbol). البكتيريا الموجبة والسالبة حسب غرام تتلوّنان إذ ذاك.ثم تعالج البكتيريات ب محلول لوغول Lugol وتتكوّن حينها مركّبات من موادّ التلوين.

    2- في الخطوة الثانية -وهي المهمّة- يختلف تفاعل البكتيريات، فبعد العلاج بالكحول - إيتانول (96 )- تفقد البكتيريا السالبة لونها المكتسب بدايةً بينما لا تتخلّى الموجبة عن لونها الأزرق الغامق الذي اكتسبته.

    ويعود هذا الاختلاف إلى بناء الجدار الخلويّ لديهما فالبكتيريا السالبة تملك طبقة هزيلة من موريين الموريين Murein لكن فوقها طبقة فوسفوليبيد Phospholipid.

    بينما يتوفّر لدى الموجبة غلاف سميك من الموريين متعدّد الطبقات التي بينها يتجمّع محلول لوغول. وهنا يكون تأثير الإيتانول مجفّفًا حيث تبقى تجمّعات الألوان متوفّرةً في الجدار الخلوي.

    هذه المرحلة -أي العلاج بالكحول- تتوجّب بعض الخبرة لتحديد تشخيصٍ أكيدٍ.

    3- الخطوة الثالثة تشمل تلوّن البكتيريات بمحلول ملطّف -أي قليل التركيز- من فوكسين الفوكسين المزاد إلى الفينول. (وبذلك ينتج اللون الأحمر لدى البكتيريات السالبة حسب تلوين غرام).

    كما توجد طرق أخرى لمعرفة تصرّف البكتيريا حسب غرام مثل اختبار KOH.

    طريقة تحضير صبغة جرام (الصبغ المركب) لصبغ البكتريا السالبة والموجبة

    (أ‌)صبغة الكريستال فايولت

    1. يذاب (1جرام) من بودرة كريستال فايولت قي (80 ملى كحول 85 ) ثم يضاف (1جرام كالسيوم أكسالات) للمحلول السابق
    2. يترك المحلول لمدة 24 ساعة قي الحضان عند درجة حرارة 25 درجة
    3. ثم يكمل المحلول السابق إلى (1 ليتر) بالماء المقطر ويترك 24 ساعة أخرى قي الحضان عند نفس درجة الحرارة السابقة
    4. يرشح المحلول بورق ترشيح للتخلص من بلورات الكالسيوم أكسالات الذائدة

    ب‌)صبغة الصفرانين

  • يذاب (2 جرام) من بودرة الصفرانين قي (ا ليتر) ماء مقطر
  • (ج) محلول لوجل اليودى

    1. يوزن (ا جرام) من اليود بالإضافة إلى
    2. يذاب (1 جرام) من يوديد البوتاسيوم قي (300 مل) ماء مقطر

    المصدر

    C. Gram أœber die isolierte Fأ¤rbung der Schizomyceten in Schnitt- und Trockenprأ¤paraten. In Fortschritte der Medizin. Vol. 2, 1884, S. 185-189.
    تصنيف كومنز Gram stains

    تصنيف فحص مجهري
    تصنيف مقالات بأسلوب استشهاد غير متناسق
    تصنيف علم البكتيريا
    تصنيف بكتيريا
    تصنيف تلوين
    Escherichia coli Gram تصغير صبغة جرام

    تعتبر صبغة جرام ( لغة إنجليزية بالإنجليزية Gram stain) من أهم أنواع الصبغات المستخدمة في المستشفيات للتعرف على البكتيريا. ويعود الفضل في اكتشافها إلى الطبيب ذو الأصل الدانماركي هانس كريستيان غرام (Hans Christian Gram) الذي كان يعمل في مختبر التشريح التابع لمستشفى برلين في العام 1880 للميلاد. حيث قام بتطوير هذه الطريقة لتساعده على التفرقة بين أنواع البكتيريا المسببة لذات الرئة (Pneumonia)، حيث كانت أحد أنواع البكتيريا تصبغ بلون أحمر وأطلق عليها (بكتيريا سالبة جرام) والأخرى باللون الأزرق (بكتيريا موجية جرام).و يعتمد لون البكتيريا في صبغة جرام على التركيب الكيميائي لجدار الخلية.

    بكتيريا البكتيريا المختلفة تتفاعل بشكل متفاوت مع طريقة التلوين. لذلك تنقسم بكتيريا إلى

    • غرام-موجبة وتتلوّن إجمالًا باللون الأزرق الغامق
    • غرام-سالبة تبقى عبر غرام دون تلوين - وإنّما تلوّن باللون الأحمر عبر الفوكسين

    ينتج عن ذلك تشخيص مختلف حسب سماكة جدار خلوي الجدار الخلويّ للبكتيربا المعيّنة وبالتالي أدوية مختلفة للعلاج. البكتيريات السالبة والموجبة تتجاوب إذًا بشكل مختلف مع ال مضاد حيوي مضادّات الحيويّة . بهذه الطريقة التي تستغرق القليل من الوقت (تقريبًا خمس دقائق) يستطيع المرء أن يحدّد التصرّف البكتيريّ حسب غرام وبالتالي أن يحدّد طريقة البدء مباشرة بعلاج غالبًا ما يكون منقذًا لحياة المريض حتّى قبل التحديد النهائيّ لنوع البكتيريا والذي يستغرق العديد من الأيّام.

    اترك تعليقاً

    لن يتم نشر عنوان بريدك الإلكتروني.