الخلفية

تفاعل البوليميراز المتسلسل اللحظي





Molecular Beacons 300 تفاعل البوليميراز المتسلسل اللحظي يستخدم جزيئات الفلوروفور (مولدة للضوء أو حاملة فلورية ) للكشف عن مستوى التعبير الجيني



تفاعل البوليميراز المتسلسل اللحظي إنج real-time polymerase chain reaction ويسمى أيضا تفاعل البوليميراز المتسلسل ألكمي اللحظي إنج quantitative real time polymerase chain reaction (بسبب قياسه كمية الحمض النووي أيضا) أو أيضا تفاعل البوليمراز المتسلسل الحركي وهو أداة مهمة في علم ألأحياء الجزيئي.


تعتمد هذه التقنية المخبرية على نفس مبدأ تفاعل البوليميراز المتسلسل ولكن ألفرق هو أنه يتم تقدير كمية دنا الدنا المتضاعف خلال حدوث التفاعل ومباشرة.


وكثيرا ما يعتمد تفاعل البوليميراز المتسلسل اللحظي على الاستنساخ العكسي لعملية تحديد كمية مرسال الحمض الخماسي النووي في خلية الخلية وكذلك رنا الرنا غير المشفر أيضا.


يتيح تفاعل البلمرة المتسلسل اللحظي رصد و قياس كميات المتتابع النووي في عينة تحمل حمض نووي خماسي سواء مؤكسد أو غير مؤكسد DNA/RNA. كمية الحمض النووي التي يتم قياسها قد تكون رقما مطلقا لعدد النسخ للمتتابع أو كمية متوازية أو متوافقة مع كمية معلومة من المتتابع النووي المدخل.



طريقة عمل التفاعل اللحظي تشبه تفاعل البلمرة التقليدي حيث تكون الخطوة الأساسية هي اكثار الحمض النووي و يتم رصد عملية الإكثار خلال تقدم التفاعل بطريقة لحظية. وهذه الخاصية تتيح رصد التفاعل حتى نقطة النهاية. توجد طريقتان لرصد المنتج في تفاعل البلمرة اللحظي (ظ،) الصبغات المشعة غير المتخصصة و التي ترتبط بأي متتابع نووي ( سكر خماسي مؤكسد) و (ظ¢) المسبار المتخصص و المحتوي على وحدات نيوكليوتيدية معلمة بجزيئات مشعة تتيح الرصد بعد عملية التزاوج بين المسبار و الحمض النووي المكملة لها